01
前 言
基质胶是3D细胞培养、类器官、成瘤、侵袭、血管生成等实验的“万能支架”。然而，从解冻到铺板，从浓度选择到结果判读，稍不留神就可能“翻车”。翌圣生物结合上万次实验反馈，整理出这份“避坑指南”，助你一次上手，稳拿高分数据。
02
到货 & 储存
问题
翌圣建议
收到货后如何保存？
将本产品置于-20℃环境存放；若短暂放置，4 ℃不超过7天。
能否反复冻融？
不建议反复冻融；首次融化后立即分装（200 µL/管），-20 ℃保存。
如何进行融化？
冷冻状态的基质胶可以在操作前一天埋藏于碎冰中，再转移入4 ℃冰箱，次日即可使用。适当延长4℃融化时间可以有效减少基质胶中的气泡。
03
颜色/浓度怎么选？
类型
特点
适用场景
含酚红
pH指示
常规实验都可以使用含酚红产品，由于酚红存在时，在温度、pH不同的情况下液体会出现颜色的差异，颜色可以在明黄色至暗红色之间变化。
无酚红
无颜色干扰
涉及颜色检测的实验，推荐使用不含酚红的基质胶，如对子宫内膜细胞培养必须使用不含酚红的基质胶。此外，酚红是一种潜在的内分泌干扰物，有可能会干扰实验动物体内激素的自然产生和代谢能力。
标准浓度
蛋白浓度：8 - 12 mg/mL
Transwell实验、皮下成瘤实验
高浓度
蛋白浓度：18 - 22 mg/mL，凝胶3-5 min
皮下成瘤中较难成瘤的细胞系
低生长因子
标准浓度基质胶的基础上做了减生长因子处理
类器官培养、血管生成
04
实验细节
场景
高频问题
解决锦囊
皮下成瘤
荷瘤不成功可能的原因
取处于对数生长期的细胞，细胞达 80 - 90% 左右密度为宜
选择 4 - 6 周龄裸鼠，小于 4 周可能不耐受过早死亡，大于 6 周免疫力会增强，不易成瘤。
可能是小鼠免疫排斥，建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠
可以在接种后一周补种1次，可以很好的提高成功率
肿瘤长起来后又消失的原因
很可能是由于炎症反应，肿瘤细胞被小鼠自身吸收造成的。若后续肿瘤依旧未长出来，可考虑更换免疫缺陷程度更大的小鼠。
血管生成
成管实验中细胞 不能形成连续的网格
建议使用3-5代状态较好且融合度70%-80%的HUVEC细胞
细胞数量过少会使细胞无法形成连续的网络
4 - 18 h可见血管生成。建议每4个小时观察一次。
侵袭实验
细胞不转移
细胞侵袭转移能力比较弱
细胞的活性太差，活性不好的细胞做侵袭实验难度较大
用胰酶消化后，必须将含血清的培养基洗去
类器官实验
类器官传代的标准
不同类器官时间不同，通常7-14日、直径100-200um左右可以传代，有些发育慢的可能要数周才能发育到适合传代状态。
鉴定类器官的方法
最基础的通过显微镜和H&E染色观察类器官形态；进一步可以用免疫荧光检测该类器官是否表达相应的biomarker；
为什么观察到的形态却和文献不一致？
决定类器官形态的因素有很多，样本来源是否相同、选用的细胞因子品质是否有差异都有可能改变最终的类器官形态。
05
产品详情
产品名称
货号
规格
Ceturegel® Matrix LDEV-Free基质胶
40183ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶
40184ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基质胶
40185ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix GFR，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶
40186ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基质胶
40187ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶
40188ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基质胶
40189ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基质胶
40190ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基质胶
40191ES
1.5 mL/5 mL/10 mL
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free Plus基质胶
40192ES
1.5 mL/5 mL/10 mL